PH0328 | Lowry蛋白定量试剂盒 (Lowry Protein Assay Kit)_蛋白定量_蛋白研究_免疫组学

产品名称 :	PH0328 \| Lowry蛋白定量试剂盒 (Lowry Protein Assay Kit)
产品品牌 :	飞净 PHYGENE

货号：PH0328

规格：500T(微孔) | 1000T(微孔)

保存：BSA 蛋白标准品 4℃保存有效期至少 3 个月，-20℃保存有效期至少一年，其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存，Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。

产品说明

Folin-酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将 Folin 试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为 5～500μg/ml 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

试剂组分

组分	500T	1000T
Folin 酚甲试剂 A	100ml	100ml×2
Folin 酚甲试剂 B	5ml	5ml
Folin 酚乙试剂(1N)	10ml	20ml
PBS 稀释液	30ml	30ml
BSA 蛋白标准品 (5mg/ml )	1ml	1ml

操作说明（以1000T为例）

1.根据需要量，取适量 Folin 酚甲试剂 A 和 B 按 50:1 混合，混合后有效期为 24 小时，过期失效。

2.根据需要量，取适量 BSA 标准品用 PBS 稀释稀释 10 倍至浓度 0.5mg/ml。若采用酶标仪法(96 孔)

3.将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板中，加 PBS 补足到 20ul。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度)，加 20ul 到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。

5.将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200ul，轻轻震动，混匀，室温放置 10 分钟。

6.各孔加入 20 微升 Folin 酚乙试剂，迅速混匀，37℃放置 30 分钟。用酶标仪测定 A650 计算蛋白浓度。

若采用分光光度计法（接上述步骤 2）

3.取八支（或者更多）5ml 离心管，标号，按下表加入试剂。

4.混匀，37℃放置 30 分钟。分光光度计测定 A650 计算蛋白浓度。

离心管号	1	2	3	4	5	6	7（样品管1）	8（样品管2）	9（样品管 3）
标准蛋白BSA	0μl	40μl	80μl	120μl	160μl	200μl	200μl适当稀释的样品1	200μl适当稀释的样品2	……
稀释液（PBS）	200μl	160μl	120μl	80μl	40μl	0μl	0μl	0μl	0μl
Folin 酚甲试剂	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml
混匀，室温放置 10 分钟
Folin 酚乙试剂	200μl	200μl	200μl	200μl	200μl	200μl	200μl	200μl	200μl