原产于中国PH1844 | DNS试剂 / DNS显色液 / 3,5二硝基水杨酸溶液 DNS Reagent

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产品名称 : PH1844 | DNS试剂 / DNS显色液 / 3,5二硝基水杨酸溶液 DNS Reagent
产品品牌 : 飞净 PHYGENE

 

货号 PH1844

规格 100mL | 500mL

存储 阴凉避光保存;有效期一年。


产品简介

DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中。


操作步骤(仅供参考)

1还原糖的提取:

2总糖的水解和提取:

3制作葡萄糖标准曲线:取干净离心管或试管,按下表进行操作,以0号调零,检测540nm处吸光度,以吸光度值为纵坐标,各标准浓度(mg/ml)为横坐标作图得标准曲线。


加入物质(ml) 

0

1

2

3

4

5

Glu标准(1mg/ml)

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

蒸馏水

1

0.8

0.6

0.4

0.2

0

DNS试剂

2

2

2

2

2

2

沸水浴中5分钟后取出,流水冷却至室温

蒸馏水

9

9

9

9

9

9

相当于葡萄糖量

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1


4、还原糖测定:取制备好的还原糖提取液或者总糖水解液1ml,分别加入DNS试剂2ml,其余操作同标准曲线的操作,540nm处测定各管的吸光度。


计算:  

还原糖的百分含量:

还原糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100    


总糖的百分含量:

总糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100×10×0.9



注意事项:

1上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。

2待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。

3如果样品还原糖浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

4总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用,×0.9是为了从测定出的总糖水解成单糖中,扣除水解时所消耗的水量。


3,5-Dinitrosalicylic acid (DNS or DNSA, IUPAC name 2-hydroxy-3,5-dinitrobenzoic acid) is an aromatic compound that reacts with reducing sugars and other reducing molecules to form 3-amino-5-nitrosalicylic acid, which strongly absorbs light at 540 nm. It was first introduced as a method to detect reducing substances in urine by James B. Sumner and has since been widely used, for example, for quantifying carbohydrate levels in blood. It is mainly used in assay of alpha-amylase. However, enzymatic methods are usually preferred due to DNS lack of specificity.

温馨提示:1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

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